90%以上男性病人的尿道分泌物作革蘭氏染色涂片可迅速找到淋球菌，而女性陰道分泌物革蘭氏染色檢查的敏感性僅約60%。直腸受累時(shí)作直腸鏡檢查可見腸壁上有粘液膿性分泌物。所有的女性，以及尿道分泌物革蘭氏染色檢查陰性或結(jié)果可疑的男性，應(yīng)作生殖道分泌物培養(yǎng)或遺傳學(xué)鑒定。有咽或直腸感染癥狀的男性和女性，均應(yīng)作培養(yǎng)或遺傳學(xué)診斷，因?yàn)楦锾m氏染色的敏感性及特異性均較差。培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)將取自尿道，子宮頸，直腸和其他感染部位的滲出物接種到適宜的培養(yǎng)基(如改良的Thayer-Martin培養(yǎng)基)，在35~36℃溫度，含有3%~10%CO2的大氣中(可用蠟燭缸)孵育48小時(shí)。24小時(shí)后已可見某些菌落；大多數(shù)在48小時(shí)出現(xiàn)。若當(dāng)時(shí)無足夠的實(shí)驗(yàn)設(shè)施，可將標(biāo)本接種到可輸送的培養(yǎng)基上運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室，在48小時(shí)內(nèi)，最好在24小時(shí)內(nèi)，作次代培養(yǎng)。 　　以基因探針為基礎(chǔ)的能可靠而快速檢測(cè)淋球菌RNA的診斷試驗(yàn)可結(jié)合檢測(cè)衣原體的試驗(yàn)，以過篩淋球菌和衣原體所致的尿道炎或子宮頸炎。在此同時(shí)以及3個(gè)月后應(yīng)作梅毒血清學(xué)試驗(yàn)(STS)，并且還應(yīng)徹底檢查病人以排除其他性傳病。